CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit-8）.pdf
一、 产品概述
CCK 8 是一款在科研和生物医学领域具有重要应用价值的产品。它全称为 Cell Counting Kit 8，是一种基于 WST 8 的广泛用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂。其原理是通过活细
胞内的脱氢酶催化 WST 8 产生黄色甲臜产物，该产物的生成量与活细胞数量成正比，因此可以通过检测吸光度来实现对细胞增殖和毒性的定量分析。常用于药物筛选、细胞毒性实
验、肿瘤药敏试验等多个研究方向。
二、 核心优势
1. 高灵敏度：能够检测到较低数量的活细胞，对于细胞数量变化的检测具有极高的灵敏度，可准确反映细胞增殖或死亡的细微变化。
2. 操作简便：整个操作过程相对简单，只需将试剂直接加入到培养板的细胞中进行孵育，然后通过酶标仪测定吸光度即可，无需复杂的样品前处理步骤，大大节省了实验时间和人力
成本。
3. 稳定性好：CCK 8 试剂具有较好的稳定性，在一定时间内可以保持活性，减少了实验误差，提高了实验结果的可靠性和重复性。
4. 低毒性：对细胞的毒性较小，在检测过程中不会对细胞的正常生理功能产生明显影响，能够更真实地反映细胞的实际状态。
5. 广泛适用性：适用于多种细胞系，无论是贴壁细胞还是悬浮细胞，都能取得良好的检测效果，具有广泛的应用范围。
四、使用方法
1. 准备细胞：将待测细胞接种到 96 孔板或其他合适的培养板中，加入适量的培养基，在适宜的培养条件下（如 37℃、5% CO₂）培养至细胞达到合适的密度。
2. 加样：根据实验设计，向培养板中加入不同浓度的药物或处理因素，继续培养一定时间。
3. 加入 CCK 8 试剂：每孔加入适量的 CCK 8 试剂（通常为 10 20 μL/100 μL 培养基），轻轻振荡培养板使试剂与培养基充分混合。
4. 孵育：将培养板放回培养箱中继续孵育 1 4 小时，具体孵育时间可根据细胞类型和实验情况进行调整，直至溶液颜色明显变化。
5. 检测吸光度：使用酶标仪在 450 nm 波长处测量各孔的吸光度值。
6. 数据分析：根据吸光度值计算细胞增殖率或细胞毒性，分析实验结果。
五、 注意事项
1. 试剂保存：CCK 8 试剂应在 20℃ 避光保存，避免反复冻融，否则会影响试剂的活性和检测效果。
2. 无菌操作：整个实验过程应严格遵守无菌操作原则，防止微生物污染，以免影响细胞的生长和实验结果。
3. 避免光照：CCK 8 试剂对光敏感，在操作和孵育过程中应尽量避免光照，可使用铝箔纸等进行包裹。
4. 细胞密度：接种细胞时要注意细胞密度的控制，过高或过低的细胞密度都可能影响检测结果的准确性。
5. 孵育时间：不同细胞系和实验条件下，CCK 8 的孵育时间可能有所不同，需要通过预实验确定最佳孵育时间。
6. 干扰物质：某些物质可能会对 CCK 8 的检测结果产生干扰，如强还原剂、金属离子等，在实验过程中应避免这些物质的存在。
具体说明以说明书为准
