一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脐带血间充质干细胞(Mouse Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells)
- 细胞别称:UCB - MSCs;脐带间充质干细胞;脐血干细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 发育阶段:新生小鼠(出生24小时内采集,无菌环境处理)
- 组织来源:脐带血(经密度梯度离心法分离纯化)
- 生长特性:贴壁生长(需细胞外基质支持)
- 细胞形态:长梭形或多边形,增殖期呈旋涡状排列
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保分化潜能与遗传稳定性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+1%双抗+10ng/mL bFGF)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 增殖能力:倍增时间约36 - 48小时(与接种密度及培养条件相关)
- 应用限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或异种移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱1小时再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:终止消化后需完全中和胰酶;首次换液需在贴壁后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬;梯度降温程序:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:存活率≥90%(台盼蓝染色法);功能验证:成骨/成脂分化潜能检测(P3代细胞应具备多向分化能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1.运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);2.到货48小时内证实微生物污染(需提供检测报告);3.细胞存活率低于85%(经台盼蓝染色复核);4.表面标志物CD29+/CD44+/CD45 - 鉴定不符
- 免责情形:1.解冻后超72小时未进行贴壁培养;2.自行更换培养基导致细胞异常分化;3.未按规范进行传代造成细胞老化;4.未定期进行支原体检测引发污染