一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠雪旺细胞(Mouse Schwann Cells)
细胞别称:神经胶质细胞、髓鞘形成细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
组织来源:周围神经系统(坐骨神经或背根神经节)
生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被培养器皿)
细胞形态:典型双极或梭形,成纤维细胞样延展形态
细胞代数:P3 - P6(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Schwann Cell Medium(含10% FBS + 神经生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含神经保护剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
注意事项:
- 消化后需完全中和酶活性(残留酶易损伤细胞膜)
- 传代后12小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:神经营养因子分泌检测(P4代细胞应维持NGF分泌能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 5天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后48小时显微照片)
4. 物种鉴定与承诺不符(需STR比对报告)
不予重发情形:
1. 未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败
2. 使用非专用培养基影响细胞增殖特性
3. 未定期更换培养基引发代谢废物累积
4. 实验操作污染导致交叉感染