货号 | 规格 | 检测方法 | 目录价 |
| M-E-P2682-48T | 48T | 夹心法 | 1800 |
| M-E-P2682-96T | 96T | 夹心法 | 2300 |
| M-E-P2682-48T（高） | 48T | 夹心法 | 2200 |
| M-E-P2682-96T（高） | 96T | 夹心法 | 2950 |
人核因子E2相关因子2（Nrf2） ELISA说明书.pdf
产品名称：人核因子E2相关因子2（Nrf2）酶联免疫吸附测定试剂盒
产品编号：M-E-P2682（高）
生产厂家：上海西酶生物科技有限公司
检测原理：本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专为体外定量检测人细胞培养上清液、血清和血浆中Nrf2蛋白浓度而设计，仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
反应类型：夹心法
反应时间：约4小时（具体时间根据实验步骤调整）
反应性：高度特异，仅针对人Nrf2蛋白，与其他转录因子及常见细胞因子无显著交叉反应。
检测方法：比色法（测定波长450nm）
灵敏度：可检测到低于试剂盒最低浓度标准品的Nrf2水平。
样本体积：根据实验步骤要求加入适量样本。
样本类型：细胞培养上清液、血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等生物样本。
特异性：与IL-1β、IL-8、TNF-α、NF-κB等常见转录因子及炎症因子无交叉反应。
重复性：操作内及操作间变异系数（CV）均＜10%，确保结果可靠性。
离心去除颗粒后，立即测定或等分装储存于≤-20℃。
使用血清分离管，室温凝结后离心，立即测定或等分装储存于≤-20℃，建议2倍稀释。
使用EDTA或肝素抗凝，离心后立即测定或等分装储存于≤-20℃，建议2倍稀释。柠檬酸盐抗凝剂未经验证。
用预冷PBS冲洗，剪碎后匀浆，离心取上清检测。
离心收集细胞，PBS清洗后破碎细胞，离心取上清检测。
离心后取上清检测。
精密度：
操作内精密度：对两个已知浓度的样品进行20次测试，变异系数（CV）分别为5.0%和8.6%。
操作间精密度：在10个单独的测定中测试两个已知浓度的样品，变异系数（CV）分别为7.9%和7.7%。
回收率：
血清：86-102%，平均回收率94%。
血浆：90-106%，平均回收率98%。
细胞培养上清：94-110%，平均回收率102%。
预包被酶标板：8×6条（48T）或8×12条（96T），未用完的密封干燥保存于2-8℃至多1个月。
标准品：1支×100μL（48T）或1支×200μL（96T），每次测试按需配置，剩余储存于2-8℃至多6个月。
100×生物素化抗体：1支×50μL（48T）或1支×100μL（96T），配置后储存于2-8℃至多6个月。
100×SA-HRP：1支×50μL（48T）或1支×100μL（96T），配置后储存于2-8℃至多6个月。
20×浓缩稀释液、显色剂A、显色剂B、终止液、20×浓缩洗涤液、封板胶纸：按说明储存。
产品说明书：1份。
保存条件：2-8℃保存，避免反复冻融和直接光照。
腐蚀性：终止液为稀硫酸溶液，具有腐蚀性，应谨慎操作。
过敏反应：试剂盒中的某些成分可能引起皮肤过敏反应，应佩戴防护用品。
皮肤刺激：显色剂B可能引起皮肤、眼睛和呼吸道刺激，应佩戴口罩避免吸入薄雾。
交叉污染：避免交叉污染，更换移液器枪头，每种试剂单独使用容器。
孵育条件：孵育步骤中需粘合好封板膜。
实验前将所有试剂恢复至室温并充分混匀。
严格按操作步骤执行，避免交叉污染。
试剂瓶盖需密闭，防止蒸发或污染。
酶标板准备：确定所需孔数，取下未使用的酶标条。
样本孵育：每孔加入标准品或样品，37℃避光反应1.5小时，洗涤3次。
抗体孵育：每孔加入生物素化抗体工作液，37℃避光反应1小时，洗涤4次。
酶标孵育：每孔加入酶结合物工作液，37℃避光反应30分钟，洗涤4次。
底物显色：每孔加入显色液A和B，37℃避光反应15分钟。
终止反应：每孔加入终止液，5分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
酶标仪（含450nm测定波长，600-680nm校正波长更佳）
移液器及枪头
蒸馏水或去离子水
100-1000mL刻度量筒
洗瓶、排枪或自动微孔板清洗机
水平轨道微孔板振荡器
用于稀释标准品和样品的试管
计算标准品和样本复孔的平均OD值，并减去空白孔的OD值作为校正值。
绘制标准曲线：以浓度为横坐标，OD值为纵坐标，使用四参数逻辑函数绘制标准曲线（要求相关系数R²＞0.99）。
计算样本浓度：根据样本OD值在标准曲线上查找对应浓度，若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，并在计算时乘以相应的稀释倍数。
数据分析：可计算样本浓度的均值、标准差，并根据需要进行t检验或方差分析等统计检验。
