

产品介绍
本产品为聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)制备试剂盒,试剂盒溶液本身不含SDS,所制备的PAGE凝胶可根据电泳缓冲液的不同,用于变性电泳(SDS-PAGE)和非变性电泳(Native-PAGE),试剂盒有6%、8%、10%、12%、15%五个不同浓度,配有改良型促凝剂,凝胶过程无需添加TEMED。本产品原料选用“Sigma”高级别试剂,溶液经多重过滤,配置的凝胶具有高效的蛋白转移能力,可保证WesternBlot数据的高度可靠性。
产品特点
1、预混配方,无需计算所需溶液量,无需稀释,只需两种液体等比例混合,简化传统制胶流程;
2、试剂盒配备改良型促凝剂,凝胶过程不用添加TEMED,避免恶毒气味,实验操作更安全、便捷;
3、 试剂盒配有染料,但不影响浓缩效果,可选择加入,使浓缩胶呈现红色,方便点样;
制胶流程
如需浓缩胶呈现彩色(方便点样),**次使用时请把1ml染料加入浓缩胶B中,摇匀。红色染料不影响电泳、染色及转膜等后续实验。
1、 取等体积的 分离胶A 和 分离胶B 混匀,
2、 向步骤1的混合溶液中加入“改良型促凝剂”注意:加入改良型促凝剂后需立即混匀,以免局部凝胶;
3、 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5cm即可,加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于分离胶之上;
4、 待分离胶凝固后(约15min),倒去上层水或醇;
5、 取等体积的 浓缩胶A 和 浓缩胶B 混匀
6、向步骤5的混合溶液中加入“改良型促凝剂”
7、 将步骤 6 的混合溶液注入制胶玻璃板中,插入梳齿;
8、 待浓缩胶凝固后(约15min),拔去梳齿即可用于电泳
关于电泳电压和电泳时间的说明
蛋白条带的分辨率和电泳美观度,与电泳电压高低相关,相对较低的电压,会跑出分辨率更高更美观的条带,但相应的电泳时间也更长;本试剂盒最高耐受电压260V,推荐电泳电压为150V—180V。
电泳时间长短和电压、胶浓度、缓冲液等因素均相关,建议客户根据自己的实验条件和实验目的选择电泳电压;参考电压和时间:160v约50分钟。
制备胶所需体积列表
0.75mm玻璃板 (n=制备胶个数) | 1.0mm玻璃板 (n=制备胶个数) | 1.5mm玻璃板 (n=制备胶个数) | ||||
| 浓缩胶 | 分离胶 | 浓缩胶 | 分离胶 | 浓缩胶 | 分离胶 | |
| 分离胶A | / | 2 ml x n | / | 3 ml x n | / | 4 ml x n |
| 分离胶B | / | 2 ml x n | / | 3 ml x n | / | 4 ml x n |
| 浓缩胶A | 1 ml x n | / | 1 ml x n | / | 1.5 ml x n | / |
| 浓缩胶B | 1 ml x n | / | 1 ml x n | / | 1.5ml x n | / |
| TEMED | 2 µl x n | 2 µl x n | 2 µl x n | 3 µl x n | 3 µl x n | 4 µl x n |
| 10% APS | 20 µl x n | 40 µl x n | 20 µl x n | 60 µl x n | 30 µl x n | 80 µl x n |