B-27 添加剂,无血清,50X

产品简介

B-27添加剂,无血清,50X，是一种最常被引用的神经细胞培养添加剂，是一种优化的无血清添加剂，用于支持胚胎、出生后和成年海马神经元和其他中枢神经系统（CNS）神经元的生长和活性维持。B-27无血清添加剂以50倍工作液提供，可以与基础培养基(Neuronal)培养基组合使用，用于神经细胞培养而无需再添加饲养层细胞。在神经元基础培养基中使用B-27添加剂，用于培养产前和胚胎神经元，以获得优化的活性和长期的存活率。

使用说明

B-27添加剂,无血清,50X，细胞培养添加剂是50×浓度。使用前请用基础培养基(如Neurobasal)稀释到1×。如准备50 mL培养基：将1 mL的B-27细胞培养添加剂(50×)加入到49 mL的基础培养基中。配置好的培养基，可于2~8℃避光保存1周。

细胞培养步骤

（1）用无菌的冷的0.05 mg/mL多聚赖氨酸水溶液包被培养表面(玻璃或细胞培养级塑料)，每平方厘米表面使用0.15 mL，在室温下保温1 h。

（2）去除多聚赖氨酸溶液，并用无菌蒸馏水冲洗两次(须彻底清洗，因为多聚赖氨酸对细胞有毒性)。在超净工作台中打开培养板的盖子通风，直到每个孔都完全干燥。培养板干燥后可以立即使用或在4°C最多保存2周。

（3）根据标准实验室程序或随细胞提供的说明书分离原代的大鼠神经元或解冻冻存的原代大鼠神经元。

（4）在预热的(37°C)神经元完全培养基中（如前所述的方法制备)接种细胞，建议的细胞密度为160个细胞/mm2，或必要时使用自行优化的细胞密度。注意：对于海马神经元，培养基中须添加25 μM L-谷氨酸，参见“完全培养基的制备”

（5）在36~38°C，含5%二氧化碳的潮湿环境中培养（使用自然空气也是可接受的，但推荐含9%氧气和5%二氧化碳的气体环境）。

（6）培养4~24h后，更换一半体积的新鲜培养基，继续在培养箱中培养。

（7）对海马神经元以外的细胞：在接种4天后，更换一半体积的新鲜的完全培养基，之后每三天重复一次。对海马神经元：接种三天后，用不含L-谷氨酸的新鲜培养基更换一半体积的培养基，之后每三天重复一次。注意：在完全培养基中添加25µM 2-巯基乙醇，可改善海马神经元的长期存活率。

注意事项

1、避免反复冻融，应及时分装，**在４℃下过夜融化，稀释时要求在无菌环境中进行。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

3、本产品仅用于科研用途。