一、细胞基本属性
细胞名称
人鼻腔黏膜上皮细胞(Human Nasal Mucosal Epithelial Cells)
细胞别称
HNEpiC;鼻腔上皮细胞;鼻黏膜上皮细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无鼻腔疾病史)
组织来源
鼻腔黏膜上皮层
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
单层铺路石样或多角形,可见典型上皮细胞紧密连接结构
细胞代数
P3 - P8(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Epithelial Cell Medium(含5% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(受培养密度及包被基质影响)
供应限制
仅限科学研究,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管:37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管,800rpm离心3分钟
· 培养瓶:酒精消毒外壁后静置于培养箱平衡1小时,再更换新鲜培养基
传代标准
融合度达80% - 90%时传代(建议每3 - 5天操作一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
· 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
· 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
注意事项
· 消化终止需加入含血清培养基中和酶活性
· 传代后12小时内避免移动培养瓶以减少机械损伤
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
推荐冻存浓度:1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 消化收集细胞后离心去上清,轻柔重悬于预冷冻存液
· 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
复苏验证
· 存活率≥90%(台盼蓝染色法)
· 功能验证:黏液分泌检测(P5代细胞应保持纤毛运动活性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. STR位点匹配率低于85%
4. 复苏后存活率<90%(需提供染色检测视频)
不予重发情形
1. 客户未按规范进行细胞复苏操作
2. 使用非指定培养基导致分化异常
3. 未定期进行支原体检测引发交叉污染
4. 细胞冻存超过推荐代数(P8)后出现功能衰退