一、细胞基本属性
细胞名称
人调节性T细胞（Human Regulatory T Cells）
细胞别称
Treg细胞；CD4+CD25+FoxP3+ T细胞；抑制性T细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无免疫疾病史）
组织来源
外周血单核细胞经免疫磁珠分选富集
生长特性
悬浮生长（依赖IL - 2等细胞因子维持活性）
细胞形态
圆形或类圆形，单细胞悬浮状态
细胞代数
P2 - P5（确保免疫抑制功能稳定性）
细胞规格
1×10⁶ cells/mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
T细胞专用培养基（含10% FBS + IL - 2+抗CD3/CD28激活剂）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
程序降温冻存液（含DMSO及蛋白保护剂），液氮长期保存
增殖能力
体外激活后增殖倍数≥5倍（72小时培养验证）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
• 激活步骤：添加CD3/CD28抗体偶联磁珠，IL - 2浓度维持100IU/mL
传代标准
细胞密度达1×10⁶ cells/mL或活性低于90%（建议每2 - 3天扩增）
传代比例
1:2至1:3（依据增殖状态调整）
收集方法
• 离心300g×5分钟去除上清，轻柔重悬于新鲜培养基
• 磁珠分离：使用磁性支架去除激活磁珠
注意事项
• 严格无菌操作（T细胞易受微生物污染）
• 定期检测IL - 2浓度，避免细胞凋亡
• 禁止使用β - 巯基乙醇等影响FoxP3表达的添加剂
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS +葡萄糖）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集活细胞，重悬于预冷冻存液
• 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后活率≥85%（台盼蓝染色法）
• 功能验证：流式检测FoxP3表达率≥70%，抑制T细胞增殖实验阳性
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活
2. 7天内经流式检测证实CD4+CD25+FoxP3+比例低于说明书标注
3. 支原体污染经第三方检测报告确认
4. STR分型与备案数据不符
不予重发情形
1. 未按说明书进行磁珠分离导致细胞纯度下降
2. 使用非指定IL - 2品牌或浓度不当
3. 未定期更换培养基导致细胞集群死亡
4. 未在指定代数内完成功能实验
