一、细胞基本属性
细胞名称
NCI - H1048细胞
细胞别称
HPMEC；肺微血管内皮细胞；肺动脉内皮细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）
组织来源
肺组织微血管段
生长特性
贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
细胞形态
典型“鹅卵石样”单层，接触抑制后呈多角形
细胞代数
P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
Endothelial Cell Medium（含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加4mL预热培养基混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭后静置培养箱2小时平衡
传代标准
细胞融合度达85% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）
传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度5×10³ cells/cm²）
消化方法
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞收缩变圆后立即终止
注意事项
- 避免过度消化（损伤细胞间连接蛋白）
- 传代后24小时更换培养基以去除残留消化酶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞后重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 转入液氮
复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥95%）
- 功能验证：Transwell通透性检测（P5代细胞应维持基础屏障功能）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡（需提供干冰状态照片）
2. 3天内证实支原体/细菌污染（需提供PCR检测报告）
3. 细胞活力低于90%（台盼蓝染色法）
4. STR鉴定与宣传不符
不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过72小时
2. 使用非推荐培养基导致细胞状态异常
3. 反复冻融操作引起细胞损伤
4. 未按规范进行支原体检测即开展实验
