一、细胞基本属性
- 细胞名称：人神经母细胞瘤细胞（Human Neuroblastoma Cells）
- 细胞别称：BE(2)-C；神经母细胞瘤细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：神经母细胞瘤组织（转移性肿瘤）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：多角形或梭形，聚集生长时可呈簇状或网状
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用中低代数以保证表型稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含含血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 1%非必需氨基酸+ 1%丙酮酸钠
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养基成分及接种密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置培养箱4小时再换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落。
- 注意事项
- 避免过度消化导致细胞膜损伤。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含血清冻存液（含10% DMSO + 90% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，重悬于冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（≥85%）。
- 功能验证：N - Myc蛋白表达检测（需通过Western Blot验证）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度记录异常（需提供物流温度监控证明）。
- 到货3日内证实支原体污染（需提供检测报告）。
- 复苏后细胞存活率低于90%（台盼蓝染色法）。
- STR分型与数据库记录不符。
- 不予重发情形
- 超时复苏（超过推荐复苏时限72小时）。
- 使用未经验证的培养基或添加剂。
- 未按规范进行传代导致细胞老化。
- 实验操作污染未及时反馈。
