一、细胞基本属性
细胞名称:SK - MEL - 28人皮肤黑色素瘤细胞
细胞别称:SK - MEL - 28;皮肤黑色素瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:黑色素瘤患者(性别及年龄信息保密,供体经病理确诊)
组织来源:皮肤黑色素瘤组织
生长特性:贴壁生长(需适当细胞外基质支持)
细胞形态:上皮样或多边形,融合后呈铺路石样排列
细胞代数:P3 - P8(确保遗传稳定性及功能一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养密度及传代操作相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种;培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱平衡2小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:避免消化过度(防止细胞膜损伤);传代后6小时内避免移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀;梯度降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后48小时观察贴壁率(应≥85%);功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P5代细胞应保持标准倍增时间)
四、售后服务承诺
重发标准:1.运输过程干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录);2.72小时内证实真菌/细菌污染(需提供污染检测图像);3.复苏后贴壁率低于80%(需提供明场显微照片);4.STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:1.未按规范进行预温培养基直接解冻;2.自行更换无血清培养基导致细胞脱落;3.未使用推荐消化试剂造成细胞团聚集;4.未执行定期支原体检测导致交叉污染