一、细胞基本属性
- 细胞名称:MHCC - 97H人高转移性肝癌细胞
- 细胞别称:MHCC - 97H;高转移肝癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:来源于肝癌患者肝组织(临床病理确诊为肝细胞癌伴转移)
- 组织来源:肝组织原发灶
- 生长特性:贴壁生长(基质蛋白依赖性)
- 细胞形态:上皮样不规则排列,局部呈现梭形伪足
- 细胞代数:P3 - P10(建议使用P5 - P8代次保证转移特性稳定)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:高糖DMEM(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(受培养基批次及接种密度影响)
- 应用限制:仅限肿瘤转移机制研究,禁止临床治疗或转基因操作
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬接种;培养瓶:酒精表面消毒后静置培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察到细胞间隙扩大后立即终止
- 注意事项:避免消化时间过长(防止细胞膜损伤),传代后6小时内避免移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养添加剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于预冷冻存液,程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后48小时检测细胞活力(台盼蓝染色存活率≥85%),Transwell实验验证迁移能力(P5代细胞迁移率需>对照组50%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度监控异常导致细胞失活(需提供温度记录)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于80%(台盼蓝染色法复检)
- STR分型与数据库不匹配
- 免责条款:
- 客户未按规范进行细胞复苏(如常温解冻)
- 使用非指定培养基导致表型丢失
- 实验操作污染导致细胞状态异常
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染